⑴ 核酸检测实验室主要仪器有哪些
1、核酸提取仪
核酸提取仪是实验室的必备仪器,应用配套的核酸提取试剂能够自动完成样本核酸的提取工作。核酸提取仪是通过磁珠提取法研制出来的一种高通量、高灵敏度的自动核酸纯化提取设备。可以利用机器磁棒架上的磁棒,将吸附有核酸的磁珠移动至不同试剂孔内,经过细胞裂解、核酸吸附、清洗与洗脱等处理,即可得到高纯度的核酸。
2、离心机
离心机也是实验室最基本的仪器,主要是血液离心和DNA、RNA样品核酸提取时用。这里推荐湖南可成离心机。
迷你离心机可使用可成Super MiniStar迷你离心机,微型离心机外观新颖独特,灵巧多用,配备两种离心转子和多种试管套,适用于1.5ml、0.5ml、0.2ml离心管和PCR用0.2ml,8连排离心管。
台式高速离心机使用可成台式高速离心机1-16K,该机型体积小,占用空间小,微机控制,配微量转子,离心速度上升快,离心效率高,常用于DNA样品核酸提取。
台式低温高速离心机可用可成台式高速冷冻离心机 1-16KR,此机型体积小巧,设计紧凑,进口高能效环保制冷系统,具有优良的温度控制性能,制冷快,是RNA样品核酸提取的理想选择。
台式低速离心机推荐使用可成台式低速离心机4-5N,此机型采用无碳刷变频电机,操作宁静噪音低,可快速分离血清。且离心腔内设有独立紫外线灭菌装置,能使细菌、病毒丧失生存力及繁殖力进而消灭细菌、病毒,达到消毒灭菌成效。
⑵ 全自动核酸提取仪介绍.
全自动核酸提取仪介绍:全自动核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器。广泛应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。
上海旦鼎国际贸易有限公司是实验室配套仪器和生命科学仪器的专业提供商。公司NP968全自动核酸提取仪是使用通用磁珠法提取核酸的高科技产品,具有自动化程度高,提取速度快,结果稳定,操作简便的优点。利用一般生化专用的96孔反应盘,可同时操作1-32个样品,可广泛应用于常规科研、基因组学、疾控系统、食品安全、法医等领域。使用本仪器只需加入样品与以磁珠为载体的全自动核酸提取试剂于96孔专用反应盘中,选择或编辑适当程序后执行即可。搭配不同种类的磁珠核酸试剂组,可以快速提取动植物组织、血液、体液、刑事检体等样品中的DNA和RNA。
⑶ 核酸pcr步骤
一、个人三级防护穿戴
带一次性帽子、佩戴医用N95、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、一层乳胶手套、外层一次性隔离衣、防护目镜、第二层乳胶手套、穿戴完毕后应尽快通过专用缓冲间或者走廊,进入核酸提取区(专业核酸提取实验室)。
二、样本灭活处理
核酸检测须有两名工作人员快速通过进入实验室,进行灭活实验操作。生物安全柜内需配备吸水棉与消毒酒精、有条件可配备吸水台布,对样本溢洒时进行紧急处理;打开二级容器,用75%酒精消毒物体表面,检测样本管密闭性后进行灭活处理,灭活条件(56℃,30min,恒温样本灭菌仪等多种方式),取出酒精灭活管用酒精擦拭外表,将样本放入到生物安全柜内。
三、手工核酸提取
操作人员进入试剂配置区或者单独的洁净实验室。
一、试剂区准备
根据说明说要求,在AW1中加入无水乙醇130mL,在AW2中加入无水乙醇160mL,计入无水乙醇后及时做好标记,在310μg的Carrier RNA中加入310μL AVE,并颠倒混匀使Carrier RNA充分溶解,就此完成洗液AW1、洗液AW2和Carrier RNA配置,而后通过传递窗传送到样本处理区,或者由专人送到核酸提取实验室中。
二、样本的裂解
用1.5ml的无菌EP管,移液器移取560μl AVL裂解液,加入5.6μl Carrier RNA,加入140μl的已灭活的待提取核酸的待测样本,涡旋振荡15s,室温静止10min。将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物,防止污染。裂解完成后,加入560μl无水乙醇,振荡混匀15s,将上述EP管放入离心机内瞬时离心以去除可能残留在EP管盖上的裂解产物,防止污染。
向离心柱加入裂解产物630μl,8000转离心1min,若离心机在生物安全柜之外,每次使用都需进行外表面消毒。更换新废液收集管,要从离心机中小心取出离心柱,将上层离心柱转移到新收集管中,继续将剩余裂解产物630μl加入离心柱中,若样本体积大于140μl时需重复此步骤,直到全部裂解产物都过柱离心,8000转离心1min,小心将离心柱转移到新的收集管中。
取500μl AW1加入离心柱中(注意,此处加样操作时务必将移液器吸头接触离心柱内壁缓慢加样),8000转离心1min。小心取出离心柱,更换新的收集管。
取500μl AW2加入离心柱中,14000转离心3min,小心取出离心柱,更换新的离心柱上端收集管,置于离心机中使用最大转速离心1min,以确保将AW2中的残液完全离心干净。
取无菌1.5mlEP管收集核酸,将离心柱上端小心放入1.5mlEP管中,取40-60μl的洗脱液AVE加入到离心柱中(注意:洗脱液应尽量全部覆盖住离心柱膜),用EP管管盖盖住离心柱,使用无菌剪刀剪去原离心柱管盖。
室温静止1min,将其放入离心机中8000转离心1min,回收核酸。丢弃离心柱,EP管中即为获取的提取核酸,做好标记与登记。
四、用仪器提取核酸
首先按照说明说准备核酸提取试剂,将200μl灭活样本添加到核酸提取试剂中,根据核酸提取仪的设置程序上机提取核酸,等仪器操作结束,提取核酸完成,回收核酸。
五、PCR体系配置
根据检测样本数量配制体系,将配制好的PCR体系充分混匀并离心后,将其通过传递窗送至样本处理核酸加样区,或单独的样本加样实验室。按照每孔分装20μL反应体系,进行分装,在各孔分别加入5μL待测样本核酸或阴阳对照物(请注意每次检测器包含1个阳性对照和3个阴性对照且阴性对照需随机分布),密封PCR管,有条件时模板加样尽量在单独的生物安全柜进行。
工作人员将配好的PCR管通过传送窗口送至PCR扩增区,或由专人送至PCR扩增实验室,上机检测。
六、上机检测及结果分析
工作人员进入基因扩增分析实验室,从传递窗取出PCR反应管,上机前需混匀并离心反应体系,按试剂盒说明说设置扩增参数并分析判读结果。分析结果时,严格阅读说明说充分了解试剂盒灵敏度、方法学局限性等综合判读实验结果。
为防止扩增污染,反应结束后的PCR扩增管严禁开盖并装入密封带中装入指定的垃圾桶中。
七、检测后的消毒处理
样本处理完成后,工作人员应用75%的酒精消毒处理外层手套并脱下外层手套,放入生物安全柜中的生物垃圾桶中。检测完成后,生物安全柜台面和地面应用0.5-1%的有效氯消毒剂或75%乙醇进行擦拭。将安全柜内产生的医疗垃圾用三层垃圾袋密封,并将其放入指定垃圾桶中,垃圾袋上需标记医疗垃圾信息。实验结束后,生物安全柜以及实验室均要进行紫外灯照射消毒,时间至少30min。
实验操作人员,应有他人用0.5-1%的有效氯消毒剂或75%乙醇对一次性隔离衣均匀喷雾消毒处理,而后脱去隔离衣将检测医用垃圾放入制定垃圾桶中,工作人员在离开二级实验室后,应在缓冲区或走廊按顺序摘脱个人三级防护用品,首先应带新的外层手套,摘掉护目镜并置于75%乙醇中消毒,自上而下、自内向外翻转脱掉一次性防护服,脱去外层手套,摘除、一次性帽子、脱一次性鞋套。脱掉手套,病毒防护服均需进行高压灭菌处理。高压前后医疗垃圾严格区分。
病毒相关垃圾需在120度,30min条件进行湿热高压处理,以高压试纸条变色为有效,而后作为普通医疗垃圾处理。
⑷ 购买核酸提取仪应注意哪些问题
核酸提取仪 主要应用在核酸提取,核酸蛋白的提仪以及分离类,但是,像这种比较的高端一点的核酸提取仪在购买的时候一定要注意几点,我这边给广大使用者提供几点购买的建议:小型自动核酸提取仪已经有多个国际品牌,国内也有多家公司生产,但是,真正得到应用的非常少,客户购买前,应遵循以下几点原则:一定要求提供样机:对样机进行实际操作,检查操作过程和试验结果。绝大多数虽然标榜的是自动提取,但是,需要非常多的人工操作,并且提取的效果并不一定满足自己下一步的实验要求。约定提取试剂的价格:在签订合同时一定把提取试剂的价格、品牌同时约定在合同中,因为多数提取试剂价格昂贵,并不是试验时销售推广者所标称的价格。提供已购买并在使用的客户:为避免购买回的仪器不能使用,最好对销售方提供的购买使用的3家客户进行实地考察,了解客户的使用情况。
⑸ 核酸提取或纯化技术主要有哪几类
核酸提取或纯化技术主要有三类:
1、传统方法(操作复杂,耗时长)
2、离心柱法(试剂盒)
3、磁珠法(可单独采购磁珠或买成品试剂盒)
其中,磁珠法可实现自动化操作,是目前比较主流的方法。
核酸提取应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。
(5)博日核酸提取仪电脑配置扩展阅读:
核酸提取的注意事项:
1、仪器的安装环境:正常的大气压(海拔高度应该低于3000m)、温度20-35℃、典型使用温度25℃、相对湿度10%-80%、畅通流入的空气为35℃或以下。
2、避免将仪器放置在靠近热源的地方,如电暖炉;同时为防止电子元件的短路,应避免水或者其他液体溅入其中。
3、进风口和排风口均位于仪器背面,同时避免灰尘或纤维在进风口聚集,保持风道的畅通。
4、核酸提取仪离其他竖直面至少10cm。
5、仪器接地:为了避免触电事故,仪器的输入电源线必须接地。
6、远离带电电路:操作人员不得擅自拆解仪器,更换元件或进行机内调节必须有持证的专业维修人员完成,不要在接通电源的情况下更换元件。
⑹ PCR实验室主要仪器设备和耗材清单
PCR实验室可分为样品制备、核酸扩散、产物分析3大区域,每个区域所用的设备不同,下面就给大家详细介绍一下PCR实验室每个区域都需要什么设备?
样品制备区:
生物安全柜 :防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散
样本低温冰箱:零下20摄氏度,-80℃ 保存样本及DNA
高速台式冷冻离心机:收集微生物菌体、细胞碎片以及其他沉淀物。 有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境
水浴锅或者金属浴:用于DNA杂交过程中水浴控温
移液器:准确量取特定体积溶液
紫外灯或者消毒车:空间环境消毒
混匀仪:移取样本前需要混匀
超净工作台:涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成
低温摇床:用于大肠杆菌和酵母菌的振荡培养
磁力搅拌器:加速溶解固体内容物
核酸扩散区:
基因扩增仪:基因检测DNA/RNA扩增
荧光定量PCR仪:核酸定量分析
核酸提取仪:样品DNA/RNA提取
移液器:准确量取特定体积溶液
紫外灯或者消毒车:空间环境消毒
超净工作台:涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成
纯水装置:用于PCR,DNA测序需要超纯水
产物分析区:
电泳仪:水平电泳用于核酸DNA/RNA检测,垂直电泳用于蛋白检测,转印电泳用于将蛋白转移到膜上做weatern检测
凝胶成像系统/紫外检测仪:用于核酸琼脂电泳和蛋白聚丙酰胺的观察和拍照;紫外分析仪用于染色后核酸琼脂电泳胶观察,不能连接电脑
电炉:电泳琼脂凝胶加热融化
⑺ 博日pcr找不到设备
查看线路连接问题
出现这种情况一般都是线路问题
杭州柏恒科技有限公司成立于2009年,是一家集研发、生产、销售及服务于一体的国家高新技术企业。公司10年以来一直专注于分子生物实验室设备,主营产品有全自动核酸提取仪、实时荧光定量PCR仪、等温荧光PCR仪、定性梯度PCR仪、全自动PCR仪以及相关配套产品等。